J Clin Invest：揭示USP9X去泛素化ALDH1A3并维持GCSs的间充质适应性

胶质母细胞会瘤（GBM）是最常见和灾难性的脑部恶性，其特点在于广泛的内互补。尽管近期在多来进行病患上都拿下了成果，但GBM很低血压的结果仍然最让人愧疚。GBM拥有一个细胞会亚群，称为GBM肿瘤会（GSCs），很强自我原先增活性和多向分化时想像力以及起始意志力。因此，有鉴于此探索针对GSC的原先病患意图。并且，醛脱氢酶（ALDH）超家族包含19种酶，它们将内源和其会醛代谢变成附加的醛。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，参与人生殖细胞会的各种生理反应每一次。越来越多的确凿证据表明，ALDH1A3在肝癌肿瘤会（CSCs）中都乏善可陈出很低活性，并影响这些细胞会内的各种生可作学特点。在GBM中都，已见到ALDH1A3作为延续间充质（MES）GSC的自我原先增和致瘤性的这两项分子。然而，MES GSCs中都ALDH1A3失调的的系统仍然是神秘的。2019年4月8日，南京医科大学第一附属医院王慧博团队等人在The Journal of Clinical Investigation上发表题为“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的文章，见到USP9X是一种真正的DUB，可调节ALDH1A3多复合可作酶体化时和稳定化时。并且，USP9X是预测ALDH1A3hi MES GSCs富集的这两项分子，是MES GSCs自我原先增和致瘤性所必需的。同时还评估了USP9X抑制对很低血压比如说的MES GSC异种移植模型的潜在治果。为了确定ALDH1A3复合可作是否被复合可作酶体 - 复合可作酶体系统（UPS）中文后操控，研究工作执法人员首先用到放线菌酮（CHX）堵塞氨基酸从头合变成并HEK293T细胞会和正常人六角形胶质细胞会（NHAs）中都的ALDH1A3氨基酸水平。实质上，ALDH1A3在CHX处理的8天内内逐渐过氧化时可作并基本上检测不到。此外，用复合可作酶体类似物MG-132处理细胞会所致ALDH1A3复合可作水平祚着增大。这些图表表明ALDH1A3通过UPS过氧化时可作。整整，研究工作执法人员寻求断定全由ALDH1A3稳定化时的潜在DUB，并用到靶向HEK293T细胞会中都的98DUB的siGENOMERTF文库进行RNAi抽样。该研究工作初始抽样断定了与ALDH1A3强调无关的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293细胞会中都的ALDH1A3共强调时，见到只有USP9X必需与内源性ALDH1A3直接相互作用，从而暗示USP9X是操控ALDH1A3稳定性的祚着候选可作。为了测试这一点，将Flag上面的WT USP9X或催化时反应失活的突变体C1566A USP9X（在催化时反应RNA的一个这两项半胱氨酸中都携带点突变）转染到HEK293T细胞会中都。 WT USP9X而非C1566A突变体的强调以剂量依赖性方式增大ALDH1A3复合可作水平，表明USP9X以依赖于其DUB活性的方式调节ALDH1A3。胶质母细胞会瘤（GBM）肿瘤会（GSC）的间充质（MES）病毒性都有癌细胞会亚群，其因其总体摧残性和对这两项麻醉药的抗性而闻名。近期已提出醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为延续GSC的MES特点的这两项决定因素。然而，支持间歇性ALDH1A3强调的的系统仍然难以捉摸。在该研究工作中都，研究工作执法人员见到复合可作酶体酪氨酸复合可作酶9X（USP9X）是MES GSC中都ALDH1A3的真正去复合可作酶体化时酶。 USP9X与ALDH1A3相互作用，解聚并稳定化时。此外，研究工作结果祚示FACS分选的USP9Xhi细胞会富集很强很低ALDH1A3活性和有效致瘤意志力的MES GSC。USP9X的消耗掉祚着下调ALDH1A3，所致MES GSC的自我原先增和致瘤意志力的剥夺，这可以通过ALDH1A3的异位强调得到不小程度的危在旦夕。此外，研究工作执法人员还验证USP9X类似物WP1130诱导ALDH1A3过氧化时可作并且在MES GSC衍生的原位异种移植模型中都祚示出祚着的病患功效。另外，USP9X与原发性人GBM混合物中都的ALDH1A3强调强烈无关，并且对于很强MES亚组的很低血压很强病状实用性。总的来说，研究工作结果揭示了USP9X作为ALDH1A3复合可作稳定化时的这两项去复合可作酶体化时酶和GSC定向病患的潜在小分子。原始应是：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019